該單管八色方案是EU-MCL和LYSA研究協作組提出的,主要是利用CD11a和LAIR低表達的特性。敏感度0.01%,而在51例MCL患者中檢測,49例符合該設門方式(詳見后),提示該方案特異度96%(其中兩例的CD11a和LAIR表達接近正常細胞,但可通過lambda、kappa限制性表達確定)。
抗體組合:
CD3/CD14/CD56- (FITC)
LAIR-1/CD305-(PE)
CD19-(PeCy7)
CD5-(PerCPCy5.5)
CD11A-(APC)
Lambda (Alexa700)
Kappa (Pacific Blue)
CD45 (V500)
檢測和分析:
至少使用100萬活細胞進行染色,獲取時至少獲取20萬個事件,陽性被定義為與初發散射光、免疫表型一致的細胞成群存在(至少20個事件)。
具體設門和分析步驟如下圖,首先選擇單個核細胞區域,然后排除粘連體,再排除掉單核、NK、T細胞,之后選擇CD5+CD19+的細胞,接著繼續選擇LAIR和CD11a低表達的細胞,最后看這類細胞的lambda、kappa限制性表達情況。
上面A圖是患者初發時,B圖是患者MRD檢測時。
『文獻來源:Minimal Residual Disease Monitoring By 8-Color Flow Cytometry In Mantle Cell Lymphoma: An EU-MCL And LYSA Study(http://www.haematologica.org/con ... aematol.2015.134957)』
抗體組合:
CD3/CD14/CD56- (FITC)
LAIR-1/CD305-(PE)
CD19-(PeCy7)
CD5-(PerCPCy5.5)
CD11A-(APC)
Lambda (Alexa700)
Kappa (Pacific Blue)
CD45 (V500)
檢測和分析:
至少使用100萬活細胞進行染色,獲取時至少獲取20萬個事件,陽性被定義為與初發散射光、免疫表型一致的細胞成群存在(至少20個事件)。
具體設門和分析步驟如下圖,首先選擇單個核細胞區域,然后排除粘連體,再排除掉單核、NK、T細胞,之后選擇CD5+CD19+的細胞,接著繼續選擇LAIR和CD11a低表達的細胞,最后看這類細胞的lambda、kappa限制性表達情況。

上面A圖是患者初發時,B圖是患者MRD檢測時。
『文獻來源:Minimal Residual Disease Monitoring By 8-Color Flow Cytometry In Mantle Cell Lymphoma: An EU-MCL And LYSA Study(http://www.haematologica.org/con ... aematol.2015.134957)』